Desenvolvimento da Proteína Ul30 Recombinante do Vírus da Enterite do Pato (in Portuguese)
Pillai Aravind S.,Madhan Mohan C.
Synopsis "Desenvolvimento da Proteína Ul30 Recombinante do Vírus da Enterite do Pato (in Portuguese)"
A enterite viral do pato, causada pelo vírus da enterite do pato (DEV), é uma doença aguda, contagiosa e letal. O DEV está atualmente classificado como pertencente à subfamília Alphaherpesvirinae da família Herpesviridae. A DNA polimerase, um produto da UL30, reveste-se de importância central para o sucesso da replicação viral no grupo de vírus Alphaherpesvirinae. A enzima viral está envolvida nos eventos iniciais dos processos de amplificação genética. A proteína UL30 é altamente conservada entre os herpesvírus ao nível da sequência de aminoácidos. Esta é uma das proteínas importantes para a replicação do vírus na célula hospedeira. As sequências de ADN que codificam a UL30 foram identificadas a partir do ADN genómico do DEV. Neste trabalho, desenvolvemos uma proteína UL30 recombinante do DEV a partir de um sistema procariótico. A proteína recombinante expressa, obtida como uma proteína de fusão com etiqueta de histidina, foi purificada por cromatografia de afinidade. A proteína recombinante purificada foi confirmada por SDS-PAGE e análise por western blot utilizando soros anti-DEV, que detetaram uma banda proteica de 80 kDa no blot. A proteína recombinante foi posteriormente submetida a diálise e concentrada utilizando filtros Amicon, tendo-se verificado que o rendimento total da proteína era de 120 g/ml.